婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定
第一法乙酰氯一甲醇甲酯化法
3原理
婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定乙酰氯与甲醇反应得到的盐酸一甲醇使试样中的脂肪和游离脂肪酸甲酯化，用甲苯提取后，经气
相色谱仪分离检测，外标法定量。
步骤
6.1试样处理
6.1.1试样含水量大于5%时，冷冻干燥至含水量小于5%。
6.1.2称取试样0.5g(精确到0.1mg)于15mL干燥螺口玻璃管(5.7)中，加入5.0mL甲苯(4.2)。.
6.1.3称取无水奶油试样0.2g(精确到0.1mg)于15mL干燥螺口玻璃管(5.7)中，加入5.0mL
甲苯(4.2)。
6.2甲酯化提取
6.2.1试样测定液的制备
在试样(6.1.2或6.1.3)中加入10%乙酰氯甲醇溶液6.0mL(4.4)，充氮气后，旋紧螺旋盖，振荡混合后于80°C+1C水浴中放置2h,期间每隔20min取出振摇一次，水浴后取出冷却至室温。将反应后的样液转移至50mL离心管中，分别用3.0mL碳酸钠溶液(4.5)清洗玻璃管三次，合并碳酸钠溶液
(4.5)于50mL离心管(5.8)中，混匀，转/分钟离心约5min。取上清液作为试液，气相色谱仪测定。
6.2.2标准测定液的制备
准确吸取脂肪酸甘油三酯标准工作液(4.7)0.5mL于15mL螺口玻璃管(5.1)中，加入4.5mL甲苯，其他操作步骤同6.2.1。
6.3色谱参考条件
色谱柱:固定液%二氰丙基聚硅氧烷，mx0.25mm，0.20um,或性能相当的色谱柱。
载气:氮气。载气流速:1.0mL/min。进样口温度:C。分流比:30:1。检测器温度:°C。
柱温箱温度:初始温度°C，保持5min，以4°C/min升温至°C，保持15min。
进样量:1.0μL。
6.4试样溶液的测定
分别准确吸取1.0μL脂肪酸标准测定液(6.2.2)及试样测定液(6.2.1)注入色谱仪，平行测定次数不少于两次，以色谱峰峰面积定量。
第二法氨水--乙醇提取法
10原理
乳与乳制品中的脂肪经皂化处理后生成游离脂肪酸，在三氟化硼催化下进行甲酯化反应，经甲酯化后的脂肪酸通过气相色谱柱分离，以氢火焰离子化检测器检测，外标法定量。
步骤
13.1试样制备
预先将需冷藏的试样从冰箱中取出，放至室温。.
13.1.1液态试样
称取10g(精确到0.1mg)试样于抽脂管中，待测。
13.1.2固态试样
13.1.2.1含淀粉试样
称取试样1.0g(精确到0.1mg)至抽脂管中(12.2)，加入0.1g高峰氏淀粉酶(11.7)，加入
10mL45°C~50°C的水，混合均匀后,用氮气排除瓶中空气，盖.上瓶塞，置45C+1°C烘箱内30min,取出。
13.1.2.2不含淀粉试样
称取试样1.0g(精确到0.1mg)至抽脂管(12.2)中，加入65°C+1°C的水10mL溶解试样，振摇，使样品完全分散。
于.上述试样(13.1.1和13.1.2)中加入2mL氨水(11.5)，于65C+1°C水浴锅中放置15min,取出轻摇，冷至室温。
13.1.3无水奶油
称取试样0.2g(精确到0.1mg)于磨口烧瓶中，按13.3所述进行皂化酯化。
13.2脂肪提取
在制备好的样品中加入10mL乙醇(11.4)，混匀。加入25mL乙醚(11.2)，加塞振摇1min。加入25mL石油醚(11.3),加塞振摇1min,静置、分层,有机层转入磨口烧瓶中。再加入25mL乙醚(11.2)及25mL石油醚(11.3)，加塞振摇1min，静置、分层，有机层转入磨口烧瓶中，再重复操作--次。合并抽提液于磨口烧瓶中，用旋转蒸发仪浓缩至干。
13.3皂化酯化
在浓缩物(13.2)或无水奶油(13.1.3)中加入1.0mL焦性没食子酸甲醇溶液(11.11)。浓缩干燥之后再加入10mL氢氧化钾甲醇溶液(11.10)置于80°C+1C水浴上回流5min~10min。再加入5mL三氟化硼甲醇溶液(11.8)，继续回流15min,冷却至室温，将烧瓶中的液体移入50mL离心管中，分别用3mL饱和氯化钠溶液(11.9)清洗烧瓶三次，合并饱和氯化钠溶液于50mL离心管，加入10mL正己烷(11.6)，振摇后，以转/分钟离心5min，取上清液作为试液，供气相色谱仪(12.6)测定。
注:三氟化硼甲醇溶液为强腐蚀性试剂，使用时应注意防护。
关键词：GB.27-婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定甲醇甲酯化法乙醇提取法