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碳酸酐酶碳酸脱水酶,EC421 [复制链接]

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碳酸酐酶(CarbonicAnhydrase,CA)是一种含锌金属酶,迄今在哺乳动物体内已发现至少有11种同工酶,它们的结构、分布、性质各异,多与各种上皮细胞泌H-和碳酸氢盐有关,通过催化CO2水化反应及某些脂、醛类水化反应,参与多种离子交换,维持机体内环境稳态。

一、概况

1.反应式

最适pH值为6~10。

2、米氏常数

3.专一性

碳酸酐酶能催化二氧化碳进行可逆的水合反应,这如同乙醛与相应的羰基化合物进行水合反应一样。此酶还具有酯酶活性。

4.抑制剂

某些阳离子(Cu2+、Ag+、Zn2+),阴离子(I-、NO3-、Br-、C1-),硫化物,氰化物与叠氮化物的重金属盐和磺胺类等物质皆能抑制碳酸酐酶。

5.纯度要求

所需的纯度为每毫克蛋白酶约含2,单位活性。

6.意义

碳酸酐酶对于维持人体内酸-碱平衡起着重要作用。它能使由细胞呼吸所生成的CO分子迅速输送到肺脏排出。

7.稳定性

该酶干粉保存在4℃下是颇为稳定的,然而溶液状态却稳定性较差。

(二)测定方法

因为碳酸酐酶具有酯酶活性,可催化乙酸对硝基苯酯反应生成对硝基苯酚,通过检测nm处吸光值上升速率反映碳酸酐酶活性。

另外还有电化学方法,即采用pH电极在0℃下测量由二氧化碳饱和的二乙基巴比妥酸缓冲液(0.M)的pH值从8.3降低至6.3所需的时间(几秒钟)。一个单位定为使pH值下降速度为非酶反应两倍所需的活性。

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